2022-223
細(xì)胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)支原體污染，該怎么辦？加油新學(xué)期謹(jǐn)記：對(duì)抗污染，預(yù)防大于一切！在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，很多小伙伴兒一直受到支原體污染的困擾，我自己養(yǎng)的細(xì)胞曾經(jīng)也遇到過支原體污染，深受其害呀！針對(duì)于支原體污染來說，大家一定注意預(yù)防！如果已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了一絲絲污染跡象，就要做到早發(fā)現(xiàn)、早挽救！如果細(xì)胞能夠救回來，還是可以繼續(xù)實(shí)驗(yàn)的，不耽誤實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。不過，確實(shí)也很難*清除??！如果說實(shí)在救不回來，那就再買一株新的細(xì)胞吧！最后，要買細(xì)胞的同學(xué)和老師，可以電話或郵箱聯(lián)系我們哦！支原體污染對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)...
查看更多2022-125
細(xì)胞培養(yǎng)基的概念01細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，并提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)。細(xì)胞培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)，它為動(dòng)物細(xì)胞的健康快速成長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。所以，只要用到細(xì)胞進(jìn)行生物技術(shù)產(chǎn)品的生產(chǎn)制造，就勢(shì)必少不了細(xì)胞培養(yǎng)基。培養(yǎng)液或培養(yǎng)基，英文都是medium。當(dāng)它是粉劑時(shí)，傾向性地稱為培養(yǎng)基，而將粉劑配成液體后，多稱為培養(yǎng)液。培養(yǎng)液中常需補(bǔ)加血清、抗生素等成分。細(xì)胞培養(yǎng)基的分類02培養(yǎng)基主要有：天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基和無血清細(xì)胞培養(yǎng)基等。天然...
查看更多2022-111
原代心肌細(xì)胞間作為主要研究模型廣泛應(yīng)用于心血管研究，經(jīng)過長(zhǎng)期的嘗試，我們實(shí)驗(yàn)室找到了一些行之有效的方法，積累了一些經(jīng)驗(yàn)?？偨Y(jié)如下：1、細(xì)胞分散和接種均勻度分離出來的心肌細(xì)胞在溶液中Ca2+的作用下容易結(jié)塊，因此，在差動(dòng)貼壁前后，應(yīng)將心肌細(xì)胞輕輕吹吹多次，形成單一分散狀態(tài)。接種后，心肌細(xì)胞應(yīng)均勻分布在培養(yǎng)板上避免細(xì)胞聚集到培養(yǎng)孔中心另外，將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱后，用滴管輕輕吹每個(gè)孔中心部分2~3次，但要特別注意避免污染。2、成纖維細(xì)胞的抑制和血清類型的選擇成纖維細(xì)胞比原代心肌細(xì)胞間...
查看更多2021-1213
細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬動(dòng)物體內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境，維持細(xì)胞體外存活和增殖的營(yíng)養(yǎng)基礎(chǔ)。它的主要功能是為細(xì)胞提供合適的pH值和滲透壓，以及細(xì)胞自身不能合成的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。細(xì)胞培養(yǎng)基系列產(chǎn)品包括旨在支持和維持細(xì)胞系生長(zhǎng)的產(chǎn)品，適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞和細(xì)胞系，經(jīng)過長(zhǎng)時(shí)間的測(cè)試和驗(yàn)證。我們開發(fā)的即用型培養(yǎng)基產(chǎn)品包括粉末和濃縮物，可以滿足您的實(shí)驗(yàn)設(shè)施和預(yù)算的雙重需求。培養(yǎng)基中特別添加了能有效改善細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的營(yíng)養(yǎng)成分和針對(duì)不同物種特選的優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基，適用于各種干細(xì)胞的體外培養(yǎng)。1、預(yù)先加入穩(wěn)定形態(tài)...
查看更多2021-1124
雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)熒光素（Luciferase）是自然界中能夠產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱，其中螢火蟲熒光素F-Luciferase和海腎熒光素R-Luciferase具有代表性。研究者利用熒光素酶開發(fā)出一套極其靈敏且使用方便的基因報(bào)告系統(tǒng)。目前，雙熒光素酶通常是指螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素。這兩種酶的主要區(qū)別：1.物種來源不同；2.它們的底物和輔因子不同；3.發(fā)光的顏色不同。螢火蟲螢光素酶是一種胞內(nèi)蛋白，從甲蟲（Photinuspyralis）中分離得到，大小為61KDa。在...
查看更多2021-118
作為主要的研究模型，原代心肌細(xì)胞被廣泛應(yīng)用于心血管研究。那么我們?cè)谘芯窟^程中都要注意些什么呢？1、新生鼠年齡的選擇新生鼠心肌細(xì)胞在出生后3天內(nèi)具有部分增殖能力，而成年鼠心肌細(xì)胞為終末分化細(xì)胞，不再具有分裂增殖能力。因此，大鼠出生時(shí)間越短，離體心肌細(xì)胞存活率越高，越容易貼壁。大量觀察表明，選擇1～3日齡大鼠分離心肌細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)是理想的，尤其是半日齡大鼠。2、消化酶的選擇和使用新生大鼠原代心肌細(xì)胞間可采用組織塊法和消化法分離。前者較少使用，因?yàn)殡y以獲得密度均勻的細(xì)胞和控制成纖...
查看更多2021-1021
一文帶你全面了解細(xì)胞因子一、細(xì)胞因子的概念細(xì)胞因子（cytokine，CK），是由免疫細(xì)胞（如單核、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞等）和某些非免疫細(xì)胞（內(nèi)皮細(xì)胞、表皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞等）經(jīng)刺激而合成、分泌的一類具有廣泛生物學(xué)活性的小分子蛋白質(zhì)（多肽或糖蛋白）。細(xì)胞因子的發(fā)現(xiàn)歷史1957年，發(fā)現(xiàn)干擾素（interferon，IFN）1969年，提出淋巴因子（lymphokine）的概念1974年，定名細(xì)胞因子（cytokine，CK）1975年，命名了腫瘤壞死因子（Tumo...
查看更多2021-923
RNApulldown實(shí)驗(yàn)技術(shù)1.實(shí)驗(yàn)原理RNApulldown是體外研究RNA與蛋白互作的重要技術(shù)。該技術(shù)是用生物素標(biāo)記體外轉(zhuǎn)錄的靶RNA分子，再用鏈霉親和素純化出與靶RNA結(jié)合的蛋白復(fù)合體，洗脫得到RNA結(jié)合蛋白質(zhì)。再通過westernblot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)特定的RNA結(jié)合蛋白是否與靶RNA結(jié)合；或通過質(zhì)譜儀檢測(cè)可以篩選出與靶RNA結(jié)合的蛋白。生物素與鏈霉親和素間的作用是目前已知強(qiáng)度最高的非共價(jià)作用；其中活化生物素可以在蛋白質(zhì)交聯(lián)劑的介導(dǎo)下，與已知的幾乎所有生物大分子偶聯(lián)。因此...
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